臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試生物化學(xué)知識(shí)點(diǎn)精講

為了幫助考生系統(tǒng)的復(fù)習(xí)2012年臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試課程全面的了解臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試教材的相關(guān)重點(diǎn)，小編特編輯匯總了2012年臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試輔導(dǎo)資料，希望對(duì)您參加本次考試有所幫助!

3.膜受體激素信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制

3.1.蛋白激酶a通路

蛋白激酶a(pka)是依賴camp的蛋白激酶的簡(jiǎn)稱。以改變靶細(xì)胞內(nèi)camp濃度和蛋白激酶a活性為主要特征，是激素調(diào)節(jié)物質(zhì)代謝的主要通路之一。

例題

在膜受體激素信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制中依賴于camp的蛋白激酶為：

a 酪氨酸蛋白激酶 b 蛋白激酶c

c 蛋白激酶a d 蛋白激酶b

答案：c

3.2.蛋白激酶c通路

肌醇三磷酸(ip3)和甘油二酯(dag)是細(xì)胞內(nèi)的第二信使。dag為脂溶性分子，生成后仍留在質(zhì)膜上。dag和ca2+在細(xì)胞內(nèi)的靶分子之一是蛋白激酶c(pkc)。pkc作用的底物蛋白質(zhì)包括質(zhì)膜受體、膜蛋白、多種酶和轉(zhuǎn)錄因子等。因此，通過(guò)pkc對(duì)下游靶蛋白的磷酸化修飾，參與多種生理功能的調(diào)節(jié)。

例題

依賴ca2+的蛋白激酶是：

a.pka b.pkc

c.pkg d.rtk

e.g蛋白

答案：b

3.3.酪氨酸蛋白激酶通路

酪氨酸蛋白質(zhì)激酶(tpk)催化蛋白質(zhì)分子中的酪氨酸殘基磷酸化，部分位于細(xì)胞膜的生長(zhǎng)因子類受體屬于tpk。這些受體被稱為受體型tpk。受體型tpk與配體結(jié)合后，將形成二聚體，同時(shí)酶活性增高，使受體胞內(nèi)部分的酪氨酸磷酸化增強(qiáng)，磷酸化的受體酶活性又進(jìn)一步增強(qiáng)。更重要的是，磷酸化的受體募集含有sh2結(jié)構(gòu)域的信號(hào)分子，從而將信號(hào)傳遞至下游分子，發(fā)揮重要的生理作用。

4.胞內(nèi)受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制

已知通過(guò)胞內(nèi)受體調(diào)節(jié)的激素有糖皮質(zhì)激素、鹽皮質(zhì)激素、雄激素、孕激素、雌激素、甲狀腺素、維a酸、1，25-(oh)2維生素d3。位于細(xì)胞內(nèi)的受體多為轉(zhuǎn)錄因子，當(dāng)與相應(yīng)配體結(jié)合后進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，與dna的順式作用元件結(jié)合，在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)基因表達(dá)。胞內(nèi)受體通常有四個(gè)結(jié)構(gòu)區(qū)域。

知識(shí)點(diǎn)三：重組dna技術(shù)

1.重組dna技術(shù)的概述(重要考點(diǎn))

1.1.概念

①自然界基因轉(zhuǎn)移和重組：重組dna技術(shù)是在人們對(duì)自然界基因轉(zhuǎn)移和重組的認(rèn)識(shí)基礎(chǔ)上創(chuàng)立的新技術(shù)。自然界基因轉(zhuǎn)移伴發(fā)重組有幾種形式：位點(diǎn)特異的重組、同源重組及轉(zhuǎn)座重組。依賴整合酶、在兩個(gè)dna序列的特異位點(diǎn)間發(fā)生的整合稱位點(diǎn)特異的重組。發(fā)生在同源序列間的重組稱為同源重組，又稱基本重組。

②重組dna技術(shù)：細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移包括接合作用、轉(zhuǎn)化作用和轉(zhuǎn)導(dǎo)作用等(各概念詳見(jiàn)課本)。在接合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)座過(guò)程中，不同dna分子間發(fā)生的共價(jià)連接即為重組。

克隆就是來(lái)自同一始祖的相同副本或拷貝的集合。獲取同一拷貝的過(guò)程稱為克隆化，也就是無(wú)性繁殖。為研究基因的結(jié)構(gòu)與功能，從構(gòu)建的基因組dna文庫(kù)或cdna文庫(kù)分離、增某一感興趣的基因就是基因克隆或分子克隆，又稱重組dna技術(shù)。

1.2.基因工程基本原理

一個(gè)完整的基因克隆過(guò)程應(yīng)包括：目的基因的獲取，克隆基因載體的選擇與改造，目的基因與載體的連接，重組dna分子導(dǎo)入受體細(xì)胞，篩選出含感興趣基因的重組dna轉(zhuǎn)化細(xì)胞。實(shí)現(xiàn)上述過(guò)程需要一些重要的工具酶，如限制性內(nèi)切核酸酶連接酶等。限制性內(nèi)切核酸酶是一類識(shí)別dna特意序列的內(nèi)切核酸酶，它的作用特異切開(kāi)雙鏈dna。

例題

限制性內(nèi)切酶的作用是：

a.特異切開(kāi)單鏈dna

b.特異切開(kāi)雙鏈dna

c.連接斷開(kāi)的單鏈dna

d.切開(kāi)變性的dna

e.切開(kāi)錯(cuò)配的dna

答案：b

①目的基因的獲取：外源基因又稱目的基因，來(lái)源于幾種途徑：化學(xué)合成、酶促合成cdna，制備的基因組dna及pcr技術(shù)。

②基因載體的選擇與構(gòu)建：可作為基因載體的dna分子有質(zhì)粒dna、噬菌體dna和病毒dna，它們經(jīng)適當(dāng)改造后仍具有自我復(fù)制能力，或兼有表達(dá)外源基因的能力。

③外源基因與載體連接：連接方式有：黏性末端連接、平端連接和人工接頭連接等。

④重組dna導(dǎo)入宿主細(xì)胞：外源dna與載體在體外連接成重組dna分子，需將其導(dǎo)入宿主細(xì)胞。隨受體細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖，重組dna分子得以復(fù)制、擴(kuò)增。

⑤重組體的篩選：鑒定哪一菌落或嗜菌斑所含重組dna分子確實(shí)帶有目的基因，即可得到目的基因的克隆，這一過(guò)程即為篩選或選擇。

⑥克隆基因的表達(dá)：在原核或真核表達(dá)體系中進(jìn)行表達(dá)，獲得所需要的蛋白質(zhì)。

例題

1.在分子生物學(xué)領(lǐng)域中，分子克隆主要是指：

a.dna的大量復(fù)制

b.dna的大量剪切

c.rna的大量復(fù)制

d.rna的大量剪切

e.反轉(zhuǎn)錄酶

答案：a

2.與重組體的篩選無(wú)關(guān)的是

a.抗藥性標(biāo)志選擇

b.分子雜交法

c.酶免檢測(cè)分析

d.免疫化學(xué)法

e.克隆載體的改建

答案:e

2.基因工程與醫(yī)學(xué)

(1)疾病基因的發(fā)現(xiàn)：不僅可以發(fā)現(xiàn)新的遺傳疾病，而且對(duì)遺傳病的診斷和治療有著極其重要的意義。

(2)發(fā)展新藥物：利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)了許多有藥用價(jià)值的蛋白質(zhì)和多肽。

(3)dna診斷：又稱基因診斷，是利用分子生物學(xué)及分子遺傳學(xué)的技術(shù)和原理，在dna水平上分析、鑒定遺傳性疾病所涉及的基因的置換、缺失或插入等突變。

(4)基因治療：是向功能缺陷的細(xì)胞補(bǔ)充相應(yīng)功能的基因，以糾正或補(bǔ)償其基因缺陷，達(dá)到治療目的。包括體細(xì)胞基因治療和性細(xì)胞基因治療。

(5)遺傳病的防治：①產(chǎn)前診斷;②攜帶者測(cè)試基因;③癥候前診斷;④遺傳病易感性。

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