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§2. 薄層色譜法 thin layer chromatography TLC
一、基本原理:
分離依據(jù):難被吸附化合物移動快,易被吸附化合物移動慢些,產(chǎn)生差速遷移?KA≠KB?分離
二、常用固定相
吸附TLC法的固定相為吸附劑,最常用硅膠,其次有硅藻土、氧化鋁、微晶纖維素、聚酰胺。
1. 硅膠:SiO2·xH2O, 具有硅氧交聯(lián)結(jié)構(gòu)、表面有許多硅醇基的多孔性微粒。硅醇基是活性基團(tuán)。含水量↑,活性↓。
活化:105℃ ~ 110℃加熱30 min,吸附力增強(qiáng)。
TLC常用硅膠G、硅膠GF254、硅膠H和硅膠HF254。
2. 氧化鋁:有堿性、中性和酸性三種
3. 聚酰胺:表面有酰胺基,與酚、羧酸、氨基酸等形成氫鍵
三、操作方法 薄層板的制備:涂布厚度0.2~0.3 mm。
點樣與展開:點樣的樣點一般為圓點,點樣基線距底邊2.0cm,樣點直徑為2~4mm。
一塊板可以點多個樣點,展開時,薄層板浸入展開劑的深度為距薄層底邊0.5~1.0cm
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(責(zé)任編輯:中大編輯)
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