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2013年執(zhí)業(yè)藥師考試中藥知識二考點解析(5)

發(fā)表時間:2012/12/13 11:03:28 來源:互聯網 點擊關注微信:關注中大網校微信

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黃酮類化合物的提取分離

一、提取

黃酮苷和極性較大的苷元:甲醇,乙醇,甲醇-水(1:1),丙酮,乙酸乙酯。

多糖苷:沸水

花色苷:0.1%鹽酸進行提取。

苷元:氯仿,乙醚,乙酸乙酯。

注意:苷類提取防止酶解。

(一)溶劑萃取法:自浸膏中先用乙醚萃取苷元,再用乙酸乙酯反復萃取苷,最后用正丁醇萃取極性較大的苷。

(二)堿提酸沉法

(1) 常用堿水:石灰水,Na2CO3,稀NaOH,堿性稀醇。

酸沉:鹽酸

注意:酸堿濃度不宜過高。

堿性過強,破壞黃酮母核;酸性過強,生成佯鹽,影響產率。

石灰水:可除去鞣質,果膠,粘液質,有利于純化。但浸出效果不及NaOH ,且有些黃酮可與鈣結合成不溶性沉淀。 稀NaOH:浸出效率高,但雜質多。

二、分離方法

分離的基本依據:

極性差異、酸性強弱、分子大小和特殊結構。

(一)柱色譜法

1、硅膠柱色譜法

適于分離異黃酮,二氫黃酮(醇)和高度甲基化或乙?;狞S酮及黃酮醇類。

分離苷元時:氯仿-甲醇混合溶劑洗脫。

分離苷時:氯仿-甲醇-水或乙酸乙酯-丙酮-水

2、聚酰胺柱色譜

適于黃酮類化合物的分離。

規(guī)律:

A:苷元相同時,以含水移動相洗脫,被吸附的強弱順序為: 苷元>單糖苷>雙糖苷>雙糖鍵苷。

B:與酚羥基的數目有關,數目越多,吸附力越強。與酚羥基的位置有關,如果酚羥基所處的位置易形成分子內氫鍵,則吸附力減弱。

查耳酮>二氫黃酮, 黃酮>二氫黃酮

C:不同類型黃酮類化合物,被吸附的強弱順序為:黃酮醇>黃酮>二氫黃酮>異黃酮。

D:分子內芳香化程度越高,共軛雙鍵越多,則吸附力越強。

3、葡聚糖凝膠色譜法

凝膠類型:Ssephadex LH-20和Sephadex G兩種類型的凝膠。

分離苷元時:利用吸附作用,游離酚羥基數目越多,則吸附力越強,越難洗脫。

分離苷時:主要靠分子篩,洗脫時按苷分子量由大到小的順序依次被洗脫出柱體。

黃酮類化合物 取代基 Ve/Vo

芹菜素 5,7,4‘-三羥基 5.3

木犀草素 5,7,3‘,4’-四羥基 6.3

槲皮素 3,5,7,3',4'-五羥基 8.3

楊梅素 3,5,7,3‘,4’,5‘-六羥基 9.2

山柰酚-3-鼠李糖基 三糖苷 3.3

半乳糖-7-鼠李糖苷

槲皮素-3-蕓香糖苷 雙糖苷 4.0

槲皮素-3-鼠李糖苷 單糖苷 4.9

常用的洗脫劑:堿性水溶液,含鹽水溶液、醇及含水醇

(二)PH梯度法:用不同濃度的堿分離

(三)硼酸絡合法 具有鄰二酚羥基的黃酮類化合物可與硼酸絡合生成易溶于 水的化合物。

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